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单光子SPAD探测器在荧光成像中的应用
【 2025-03-24 08:49 】【 浏览 8 】

单光子SPAD探测器Single Photon Avalanche Diode)是一种高灵敏度的光探测器,能够在非常低的光照条件下工作,甚至能够检测单个光子。


单光子SPAD探测器

高灵敏度荧光信号检测

- 荧光成像中,样品发出的荧光信号往往非常微弱,传统探测器可能无法有效检测。单光子SPAD探测器具有极高的灵敏度,能够探测到单个荧光光子,大大提高了对微弱荧光信号的检测能力。例如,在研究细胞内低丰度蛋白质的分布时,SPAD探测器可以检测到单个荧光标记蛋白发出的微弱荧光,帮助科学家更清晰地观察蛋白质在细胞内的定位和动态变化。

实现超高分辨率成像 

- 根据瑞利判据,光学成像的分辨率受限于光的波长和物镜的数值孔径。而单光子SPAD探测器配合相关算法,可突破传统光学成像的分辨率极限。如受激发射损耗(STED)荧光成像技术中,SPAD探测器结合特殊的光调制手段,通过精确探测单个荧光光子的发射位置,能够实现纳米级的分辨率,让科学家观察到细胞内更精细的结构,如细胞器的亚结构、细胞骨架的细节等。

荧光寿命成像

- 不同荧光物质具有不同的荧光寿命,通过测量荧光寿命可以区分不同的荧光分子,以及了解分子所处的微环境。单光子SPAD探测器可以精确记录每个荧光光子的到达时间,结合时间相关单光子计数(TCSPC)技术,能够实现对荧光寿命的高精度测量。例如,在研究生物分子的相互作用时,通过荧光寿命成像可以监测荧光标记的生物分子在结合前后荧光寿命的变化,从而推断分子间的相互作用情况。

多通道荧光成像

- 单光子SPAD探测器可以与多通道检测技术相结合,同时检测多个不同波长的荧光信号。这样可以在一次成像中对多种荧光标记的生物分子进行同时观察,实现对复杂生物体系中多个目标的同步分析。例如,在肿瘤细胞的研究中,可以用不同颜色的荧光染料标记肿瘤细胞的不同标志物,通过多通道荧光成像,同时观察这些标志物在肿瘤细胞中的分布和表达情况,有助于深入了解肿瘤细胞的生物学特性和病理机制。

实时动态成像 

- SPAD探测器具有快速的响应速度,能够实时捕捉荧光信号的变化。在活细胞成像中,可以实时监测细胞内的动态过程,如细胞内钙离子浓度的变化、信号转导过程中荧光蛋白的表达和分布变化等。这对于研究细胞的生理活动和疾病发生发展过程中的动态变化具有重要意义,有助于揭示细胞内各种生理过程的实时机制。

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